Otimização de ELISA empregando a proteína Tc85-11 e planejamento fatorial
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Keywords

T. cruzi
Tc85-11
ELISA
doença de Chagas

How to Cite

Zanoni, T. B., Carlos, I. Z., Tognolli, J. O., Yamanaka, H., & Ferreira, A. A. P. (2006). Otimização de ELISA empregando a proteína Tc85-11 e planejamento fatorial. Eclética Química, 31(1), 63–72. https://doi.org/10.26850/1678-4618eqj.v31.1.2006.p63-72

Abstract

A doença de Chagas é causada pelo Trypanosoma cruzi (T. cruzi) e a detecção de anti-
corpos anti-T. cruzi no soro é um método para diagnosticar a doença. Neste trabalho, ELISA indi-
reto foi otimizado para a detecção de anticorpos no soro de pacientes com doença de Chagas
empregando a proteína Tc85-11 (Ag) da superfície do parasita tripomastigota. Na otimização das
condições experimentais foi aplicado planejamento fatorial completo para os parâmetros tempo
de incubação, diluições do Ag (0,08 mg mL -1 ), anticorpo primário (Ac) e anti-IgG conjugada com
a peroxidase (Ac*). Os melhores resultados foram obtidos nas seguintes condições: 0,14 mg
Ag/poço, 60 min para o tempo de incubação, diluições de 1:35 e 1:1000 para Ac e Ac*, respecti-
vamente. O valor do limiar de reatividade (“cut off”) foi A 450nm = 0,371. O ELISA indireto foi
aplicado em amostras de soros de pacientes infectados com doença de Chagas e pacientes com
diferentes doenças sistêmicas. A proteína Tc85-11, a qual está envolvida com a adesão do para-
sita na célula hospedeira, é também apropriada para o diagnóstico sorológico da doença de
Chagas.
https://doi.org/10.26850/1678-4618eqj.v31.1.2006.p63-72
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References

www.who.int/tdr/diseases/chagas/direction.htm. Acessado

em 22/02/06.

J. Costa, C.E. Almeida, E.M. Dotson, A. Lins, M. Vinhaes,

A. C. Silveiras, C.B. Beard, Mem. Inst. Oswaldo Cruz 98(4)

(2003) 443.

Z. Brener, Z.A Andrade, M. Barral-Netto, Trypanosoma

cruzi e doença de Chagas. 2. ed. Rio de Janeiro: Guanabara

Koogan, 2000.

S. L. M. Ávila, A. V. Ferreira, Diagnóstico laboratorial das

principais doenças infecciosas e auto-imunes. Rio de Janeiro:

Guanabara Koogan, 1996.

A. Voller, C. Draper, D. E. Bidwell, A. Bartlett, Lancet 1

(1975) 426.

D. C. Cannova, M. C. Aguilar, M. Pacheco, M. I. Simons,

M. Medina, Rev. Fac. Cien. Salud. 6(3) (2002) 4.

M. Schechter, A. O. Luquetti, J. M. Rezende, A. Rassi, M.

A. Miles, Trans. Roy. Soc. Trop. Med. Hyg. 79 (1985) 637.

E. S. Umezawa, M. S. Nascimento, A. M. S. Stolf, Diagn.

Micr. Infec. Dis. 39(3) (2001) 169.

M.A. Krieger, A. Almeida, W. Oelemann, J.J. Laffaille,

J.B. Pereira, H. Krieger, M. R. Carvalho, S. Goldenberg, Am.

J. Trop. Med. Hyg. 146(4) (1992) 427.

E. S. Umezawa, S. F. Bastos, J. R. Coura, M. J. Levin,

A. Gonzalez, Rangel-Aldao R, B. Zingales, A. O. Luquetti, J.

F. Silveira, Transfusion 43(1) (2003) 91.

M. Marroquin-Quelopana, Jr. S. Oyama, T. A. Pertinhez,

A. Spisni, M. A. Juliano, L. Juliano, W. Colli, M. J. M. Alves,

Biochem. Biophys. Res. Com. 325 (2004) 612.

A. A. P. Ferreira, W. Colli, M. J. M Alves, D. R. Oliveira,

P.I. Costa, A.G. Güell, F. Sanz, A. V. Benedetti, H. Yamana-

ka, Bioelectrochem. 2005. Aceito para publicação.

B. Barros Neto, I. S. Scarminio, R. E. Bruns. Como fazer

experimentos: pesquisa e desenvolvimento na ciência e na

indústria. 2. ed. Campinas: Editora da Unicamp, 2003.

M Otto, Chemometrics: statistics and computer applica-

tion in analytical chemistry. Toronto: Wiley-VCH, 1999.

M. A. Johansson, K.E. Hellenas, Analyst 129(5) (2004)

D. R. Oliveira, Caracterização de clones que codificam

membros da família multigênica Tc85-11 de Trypanosoma

cruzi. 98f. Tese (Doutorado em Bioquímica) - Instituto de

Química, Universidade de São Paulo (USP), São Paulo, 2004.

A. A. P. Ferreira, Imunossensor amperométrico empre-

gando a proteína Tc85-11 e investigações da interação da pro-

teína com anticorpo anti-T. cruzi por microscopia de força

atômica. 95 f. Tese (Doutorado em Biotecnologia) – Instituto

de Química, Universidade Estadual Paulista (UNESP),

Araraquara, 2005.

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