Otimização de ELISA empregando a proteína Tc85-11 e planejamento fatorial

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Published: Mar 27, 2006
DOI: https://doi.org/10.26850/1678-4618eqj.v31.1.2006.p63-72
Keywords:
T. cruzi, Tc85-11, ELISA, doença de Chagas

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Thalita Boldrin Zanoni
Centro Universitário Barão Mauá, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Ribeirão Preto, Brasil.
Iracilda Zepponi Carlos
Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Araraquara, Brasil.
João Olímpio Tognolli
Universidade Estadual Paulista, Instituto de Química, Araraquara, Brasil.
Hideko Yamanaka
Universidade Estadual Paulista, Instituto de Química, Araraquara, Brasil.
Antonio Aparecido Pupim Ferreira
Universidade Estadual Paulista, Instituto de Química, Araraquara, Brasil.

Abstract

A doença de Chagas é causada pelo Trypanosoma cruzi (T. cruzi) e a detecção de anti-
corpos anti-T. cruzi no soro é um método para diagnosticar a doença. Neste trabalho, ELISA indi-
reto foi otimizado para a detecção de anticorpos no soro de pacientes com doença de Chagas
empregando a proteína Tc85-11 (Ag) da superfície do parasita tripomastigota. Na otimização das
condições experimentais foi aplicado planejamento fatorial completo para os parâmetros tempo
de incubação, diluições do Ag (0,08 mg mL -1 ), anticorpo primário (Ac) e anti-IgG conjugada com
a peroxidase (Ac*). Os melhores resultados foram obtidos nas seguintes condições: 0,14 mg
Ag/poço, 60 min para o tempo de incubação, diluições de 1:35 e 1:1000 para Ac e Ac*, respecti-
vamente. O valor do limiar de reatividade (“cut off”) foi A 450nm = 0,371. O ELISA indireto foi
aplicado em amostras de soros de pacientes infectados com doença de Chagas e pacientes com
diferentes doenças sistêmicas. A proteína Tc85-11, a qual está envolvida com a adesão do para-
sita na célula hospedeira, é também apropriada para o diagnóstico sorológico da doença de
Chagas.

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Zanoni, T. B., Carlos, I. Z., Tognolli, J. O., Yamanaka, H., & Ferreira, A. A. P. (2006). Otimização de ELISA empregando a proteína Tc85-11 e planejamento fatorial. Eclética Química, 31(1), 63–72. https://doi.org/10.26850/1678-4618eqj.v31.1.2006.p63-72
Issue
Vol. 31 No. 1 (2006): Eclética Química
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