Otimização de ELISA empregando a proteína Tc85-11 e planejamento fatorial
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Abstract
corpos anti-T. cruzi no soro é um método para diagnosticar a doença. Neste trabalho, ELISA indi-
reto foi otimizado para a detecção de anticorpos no soro de pacientes com doença de Chagas
empregando a proteína Tc85-11 (Ag) da superfície do parasita tripomastigota. Na otimização das
condições experimentais foi aplicado planejamento fatorial completo para os parâmetros tempo
de incubação, diluições do Ag (0,08 mg mL -1 ), anticorpo primário (Ac) e anti-IgG conjugada com
a peroxidase (Ac*). Os melhores resultados foram obtidos nas seguintes condições: 0,14 mg
Ag/poço, 60 min para o tempo de incubação, diluições de 1:35 e 1:1000 para Ac e Ac*, respecti-
vamente. O valor do limiar de reatividade (“cut off”) foi A 450nm = 0,371. O ELISA indireto foi
aplicado em amostras de soros de pacientes infectados com doença de Chagas e pacientes com
diferentes doenças sistêmicas. A proteína Tc85-11, a qual está envolvida com a adesão do para-
sita na célula hospedeira, é também apropriada para o diagnóstico sorológico da doença de
Chagas.
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